Hola Comunidad;
Hoy estaba realizando la publicación de una aplicación web interna que estaba compilada con NetFramework 4.0 en un IIS 7.5 con Windows Server 2008 R2 y me estaba mostrando el error: HTTP Error 500.0 – Internal Server Error Calling LoadLibraryEx on ISAPI filter «C:\Windows\Microsoft.NET\Framework\v4.0.30319\\aspnet_filter.dll» failed. Para ello les traigo una solución al inconveniente.

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Ingresamos al IIS 7.5 Manager y nos posicionamos en el Home del Servidor, luego filtramos en busca de ISAPI Filters e ingresamos.

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Luego verificamos que una de las rutas tiene un backslash («\») de más.

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Hacemos clic secundario sobre la ruta que tiene el backslash («\») de más y hacemos clic en Edit…

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Eliminamos el backslash («\») de más y hacemos clic en OK.

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Y por ultimo ingresamos al Command Prompt para hacer un iisreset y reiniciar todo el servicio.

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Con ello ya no deberían de tener el inconveniente, Muchas Gracias!